南京大学鼓楼校区坐落在南京市中心区域，位于鼓楼区，与南京市中心鼓楼广场相邻，汉口路将鼓楼校区划为南园、北园，南园是学生宿舍生活区，北园是教学科研区，面积近800亩。

南京大学鼓楼校区为金陵大学旧址所在地，北园金陵苑一带为中华传统风格建筑群，其中的北大楼已经成为南京大学的标志性建筑。鼓楼校区有南京大学考古与艺术博物馆、南京大学地球科学博物馆、南京大学校史博物馆等。南园有孙中山就任中华民国临时大总统时的故居，还有设立了拉贝与国际安全区纪念馆的拉贝故居，北园有赛珍珠故居、何应钦故居（斗鸡闸）等。