质粒的多克隆位点上有很多限制酶的酶切位点，就是有多个限制性内切酶的切割位点，是为了重组基因时插入目的基因的，可以采用双酶切的方法酶切质粒和目的片段，产生粘性末端，再使酶切后的质粒和目的基因进行连接，就可以获得了插入了目的基因的质粒，可以进一步进行转化实验。