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艺术设计
如何给一段序列增加一个酶切位点
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  • 教育巴啦啦
    已解决
    2024-01-16 21:04
    如何给一段序列增加一个酶切位点求高手给解答问题补充:
    如何给一段序列增加一个酶切位点求高手给解答
    解决时间 2025-12-24 10:30
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  • 最佳答案
  • 2024-01-16 21:04
  • 你可以设计带有酶切位点的引物,对目的基因进行PCR,就可在目的基因上引入酶切位点。

    步骤:引物设计(借助软件)——合成引物(公司合成)——PCR。最重要的一个仪器就是PCR仪了,具体的加什么试剂,加多少,我想楼主应该是做分子生物学,这些应该挺清楚的了。楼主,引物一般是用软件设计,例如Primer.5,你根据你的目的基因两端的特点,设计合适的引物,然后在引物上再添加酶切位点 ,例如EcoRⅠ 是应用最广泛的限制性内切酶,酶切位点和切割位点如下: 5' G↓AATTC 3' 3' CTTAA↑G 5' ,你就可以在这两条引物上分别添加这几个脱氧核苷酸,这不就在引物中引入酶切位点了吗?经过PCR后引物和目的基因连在一起,酶切位点自然也连上去了。楼主,你可以根据需要,引入不同的限制性内切酶的酶切位点。

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