在NCBI（National Center for Biotechnology Information）上设计引物，首先需要找到目标基因的序列。

可以通过NCBI的GenBank数据库搜索相关物种的目标基因。找到后，点击FASTA格式下载序列。然后，使用在线引物设计工具如Primer-BLAST或NCBI的Primer-Design Tool。以Primer-BLAST为例，输入目标序列，设置引物长度、Tm值等参数，系统会自动生成合适的引物对。最后，检查引物的特异性，确保它们不会与非目标序列形成二聚体，并评估引物效率以确保PCR反应的成功。