在NCBI（National Center for Biotechnology Information）设计引物，首先需要找到目标基因的序列。

你可以通过NCBI的GenBank数据库搜索相关物种的目标基因。找到后，点击FASTA格式的序列链接以获取纯序列信息。接下来，使用Primer-BLAST工具来设计引物。Primer-BLAST是NCBI提供的一个在线引物设计软件，它可以自动评估引物的质量，包括退火温度、特异性等参数。进入Primer-BLAST页面后，输入目标基因的FASTA序列，选择适当的引物长度和GC含量范围，然后提交任务。系统会为你生成一系列可能的引物对。最后，从生成的结果中筛选出特异性好、Tm值适中且G+C含量合适的引物对。你可以根据实验需求进一步调整引物参数，直到得到满意的引物对为止。